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想必现在有很多小伙伴对于层析柱纯化抗体前一定要硫酸氨沉淀吗方面的知识都比较想要了解，那么今天小好小编就为大家收集了一些关于层析柱纯化抗体前一定要硫酸氨沉淀吗方面的知识分享给大家，希望大家会喜欢哦。
1、硫酸铵可能会损坏某些蛋白。加入硫酸铵晶体时应小心：局部浓度过高可能会造成不需要的蛋白沉淀。
2、对于常规可再生的纯化过程，可以避免使用硫酸铵沉淀以利于层析。
3、通常沉淀对于浓度低于1mg/ml的蛋白几乎无效。
4、版共权归认芝士回设答网站或证原作者所队有
5、沉淀所需溶液：
6、饱和硫酸铵溶液（在100ml蒸馏水中加入100g硫酸铵，搅拌溶解）。
7、当新气者果她受步群段且千委选斯。
8、1M Tris-HCl，pH 8.0
9、用于第一步纯化的缓冲液。
10、有到也所部制四或问志土般，劳选派包。
11、方法：
12、1，过滤（0.45μm膜）或离心样品（4°C 10000g）。
13、2，每10倍体积的样品中加入一倍的1M Tris-HCl，pH 8.0以维持pH值。
14、3，温和搅拌。逐滴加入硫酸铵溶液，最高至50%饱和度。搅拌1小时。
15、4，10000g离心20min。
16、5，去除上清，用等体积相同浓度的硫酸铵溶液（如不能溶解沉淀也不会造成进一步沉淀的溶液）洗涤重悬沉淀两次。再次离心。
17、6，使用少量体积后面步骤所需的溶液溶解沉淀。
18、7，硫酸铵在净化/更换缓冲液步骤中使用脱盐柱除去。
本文到此结束，希望对大家有所帮助。
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